精彩演讲
返回上一级 使用MS分光仪对混合短肽进行所含肽段的定性定量分析
京都大学 佐藤健司教授
对肽的研究方兴未艾，介于蛋白质和氨基酸之间的肽，有着无穷的组合和生物活性的可能性。目前，不同氨基酸排列的肽段，其生物活性被不断发现，而由蛋白水解所得的食源性混合肽的临床功效也不断被报道。
另一方面，虽然由两个或三个氨基酸组成的短肽（二肽、三肽）能被小肠直接吸收之事实已被公认，且短肽作为人体吸收蛋白质的主要吸收模式，其营养价值已成公理；但仍然有许多学者坚持短肽在被吸收进入血液的过程中绝大部分被分解为单个的游离氨基酸，即使有部分直接进入血液循环，其在血液以及在人体组织中的存在周期极短。这些论断使得短肽对人体的各种作用失去物资的机理基础。
本人在长期从事短肽研究的过程中发现，许多短肽特别是含有经过焦化反应（Piro）谷氨酰胺的短肽能直接进入血液，并能较长时间保持在血液中的浓度。同时也求证了这些短肽显著生理活性。
试验目的：
本试验旨在对食源性混合短肽所含有的主要肽段进行定性定量分析，为其生物活性求证物资基础。为了使这种物质求证更加具有说服力，本实验同时测定三种状态下的肽段结构和含量，即：1、食源性混合肽产品中所含有的肽段分析；2、被小肠肽消化酶处理过的混合肽产品中的肽段分析；3、食用这种混合肽产品前后人体血液中不同时段的同种肽段含量分析。并将几种分享结果相互参照比较的基础上，再对照来源蛋白的已知基因结构。
试验方法：
由于LC-MS和MSMS的计算机分析存在不确定性，而肽段的氨基酸分析仪的分析能力和所需时间较长，本实验综合使用两种复合HPLC（高速液相分析），即SEC（Superdex Peptide）和RP-HPLC的基础上，再选用LC-MS和MSMS分析。
结果：
比较确定地对所提供的食源性混合肽产品中含量较高的10-30个肽段进行定性定量分析，同时部分证实这些肽段在消化酶作用后及在食后血液中的存在。证实这些短肽的含量足以起到各自的生理作用。这些方法正在继续探求和互证过程中，有望提供一个可信度较高的混合短肽中主要肽段的定性定量测定试验模型。
